2×Taq plus Master Mix含紅色染料

注：以50μl PCR反應體系為例，1ml可40次PCR反應，5ml可做200次PCR反應，25ml可1000次PCR反應，100ml可做4000次PCR反應。

產品簡介：

本制品是將PCR反應所需的Taq酶、dNTPs、Mg²⁺以及反應緩沖液預先配制成2倍濃度的混合物。2×Taq plus Master Mix專為常規(guī)PCR擴增反應優(yōu)化，擴增長度可達8kb，能對4kb及其以下長度的片段進行高效地擴增。使用時只需再加入模板和引物并稀釋到1倍濃度即可進行PCR反應，大大地簡化了操作過程，減少了PCR操作過程中的污染。提供普通型/快速上樣型兩種形式供您選擇。經測試，染料的加入不影響PCR反應，在PCR反應完成后可直接電泳，節(jié)省時間。使用本試劑擴增得到的PCR產物3´端有一突出"A"堿基，可直接克隆于T載體中。

產品特點 ：

高效：以λDNA為模板，擴增長度可達8kb，能高效擴增≤4kb片段。

靈敏：可從0.05ng人基因組DNA模板中擴增出特定基因片段。

穩(wěn)定：反復凍融幾十次，4℃放置30天，室溫放置一周后，擴增性能不受影響。

快捷：PCR反應所必需試劑集于一管，數分鐘即可完成反應體系配制。

便利：PCR反應后可直接電泳。

質量保證：

經檢測無外源核酸酶殘留，qPCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留，能有效擴增人基因組中的單拷貝基因。

使用說明：

1、冰浴中徹底融化2×Master Mix，混勻后離心快甩將溶液收集到管底。

2、按照下表在0.2ml PCR管中制備反應體系：

3、快甩離心將反應液收集到管底。
4、PCR儀如果沒有熱蓋加熱的話，補加25μl礦物油。
5、PCR儀上執(zhí)行以下程序：
步驟溫度時間循環(huán)數
預變性94℃2min1
變性94℃30sec
退火Tm-5℃*30sec25-32*
延伸72℃60s/kb
最后延伸72℃5-10min1
注：PCR反應條件視模板、引物等的結構條件不同而各異。在實際操作中需根據模板、目的片段的大小、堿基序列和引物的長短等具體情況，根據比例放大或縮小體系，設定最佳的反應條件（溫度、時間等）。
6、電泳檢測：含染料的2×TaqplusMasterMix可以直接上樣。
注意事項：
1、需要溶解完全后使用，防止離子濃度不均勻。
2、菌液PCR時預變性時間≥5min，更有利于破壁。
3、應根據實驗目的選擇合適循環(huán)數，循環(huán)數過少，會造成擴增量不足；循環(huán)數過多，擴增量增加，但突變率也會增加，并造成非特異性擴增。
4、根據引物Tm值設置合適退火溫度，退火溫度過低，會造成非特異性擴增；過高可能擴增不出來。
5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
保存條件:
-20℃保存兩年有效；4℃穩(wěn)定貯存6個月。經常使用時，一旦融化后請4℃貯存，盡量
避免反復凍融。
注：如保存溫度長期低于-30℃或遇干冰急凍，本產品顏色會變淺直至變黃（與急凍程
度相關）。經測試，該變化不影響使用效果。