Sybr Green II 核酸染料（10,000×DMSO）

產(chǎn)品描述：

本品用DMSO溶解，因為DMSO熔點是18.5℃,使用前請放置到室溫充分溶解。

產(chǎn)品特點：

1.無毒性：屬花箐類染料，容易生物降解，無致癌毒性。

2.靈敏度高：至少可檢出20pg ssDNA或RNA，高于EB染色法25～100倍。

3.信噪比高：樣品熒光信號強，背景信號低。

4.操作簡單：與 EB 一樣，在預制膠和電泳過程中染料不降解；而電泳后染色過程也只需30 分鐘且無需脫色或沖洗，即可直接用紫外凝膠透射儀或可見光透射儀觀察。

5.適用范圍廣：可選擇電泳前染色（膠染法）或電泳后染色（泡染法）；適用于瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、脈沖電場凝膠電泳和毛細管電泳等；可用于 ssDNA 或 RNA 染色。

6.使用方便：對分子生物學中常用的酶（如：Taq 酶、反轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等）沒有抑制作用。 

7.經(jīng)濟：價格比銀染便宜。

使用方法：

1．膠染法（用法同EB）（推薦方法）

（1）制膠時加入SYBR Green II 核酸染料。冷卻膠至50℃左右，每100mL膠中加入3～5μL  SYBR Green II 10,000× 儲液，以此比例類推。

（2）按照常規(guī)方法進行電泳。

注意事項：此方法染色可以準確確定核酸片段分子量，染料用量相對較少。1mL染料大約可以做300塊 100mL的膠。

由于SYBR Green II熱穩(wěn)定性較差，不能在熱的膠溶液中直接添加，需要等待溶液冷卻至50℃左右才能添加。搖晃，振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。

2．泡染法

（1） 按照常規(guī)方法進行電泳。

（2） 用pH 7.0～8.5 的緩沖液（如：TAE，TBE 或 TE），按照10000﹕1的比例稀釋SYBR Green II  10,000× 儲液，混勻，制成1× 染色液。

（3） 將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的1× 染色液浸沒凝膠。用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10～30分鐘，染色時間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色，將配好的1× 染色液輕輕地倒在膠板上，讓其均勻地覆蓋整個膠板，并染色30分鐘。玻璃平皿必須預先經(jīng)過硅烷化溶液處理（避免染料吸附在玻璃表面上）。

注：用泡染法染色時，可以精確確定核酸片段分子量。但染料用量較多。

保存方法：

2-8℃避光干燥可保存24個月。